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當前位置:首頁技術文章大牛是這樣做成骨細胞誘導實驗的!

大牛是這樣做成骨細胞誘導實驗的!

更新時間:2021-06-07點擊次數:2393

       一、實材料及試劑

       培養板、酒精燈、移液槍、CO2培養箱、顯微鏡等MC3T3-E1(前成骨細

 

       二、實驗內容

       試驗方法:將MC3T3-E1(前成骨細胞)細胞接種于含MEM-α培養基(10%胎牛血清,1%青鏈霉素)的培養瓶內,放置于二氧化碳培養箱(37℃,5%CO2,潮濕)培養,每三天更換一次培養液,待細胞鋪滿瓶底的80%以上時,用胰蛋白酶消化,加入MEM-α培養基(10%胎牛血清,1%青鏈霉素),將細胞吹打下來并吸取到10 mL離心管中,離心,棄上清,注意不要碰到管口,加入MEM-α培養基(10%胎牛血清,1%青鏈霉素)重懸,將細胞按照每孔1.2×105個細胞數接種于六孔板中,實驗組加含誘導劑(50ug/mL抗壞血酸和10mmol/Lβ-甘油磷酸鈉)的培養液,對照組用常規培養液進行培養,每三天更換一次培養液。

 

       三、注意事項

       1、實驗操作過程中要避免污染。
       2、消化時間不宜過長。
       3、誘導后細胞易脫壁,換液操作要盡可能輕。

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